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生物化学实验技术 版权信息
- ISBN：9787040488746
- 条形码：9787040488746 ; 978-7-04-048874-6
- 装帧：一般胶版纸
- 册数：暂无
- 重量：暂无
- 所属分类：>
生物化学实验技术 内容简介
本书分为实验技术理论、基础性实验和综合性实验三部分。实验技术理论部分主要介绍了生物化学常用的离心技术、层析技术、电泳技术以及生物大分子制备技术。基础实验部分适用于生物类和农科各专业生物化学实验基本技能的训练 ; 综合性实验部分适用于相关专业本科生生物化学综合设计性实验技能与素质训练, 也可用于研究生教学参考。本书附录列举了生物化学实验室安全与防护、常用试剂和溶液的配制以及常用的基础数据等内容。
生物化学实验技术 目录
**部分 实验技术理论
1.1 离心技术
1.1.1 离心沉降速率影响因素
1.1.2 沉降系数
1.1.3 离心设备
1.1.4 离心分离方法
1.1.5 离心操作的注意事项
1.2 层析技术
1.2.1 层析的基本概念
1.2.2 层析的基本原理
1.2.3 层析技术的分类
1.2.4 柱层析简介
1.2.5 常用的层析方法
1.3 电泳技术
1.3.1 电泳的基本原理
1.3.2 影响电泳的主要因素
1.3.3 电泳的类型
1.3.4 醋酸纤维素薄膜电泳
1.3.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳
1.3.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
1.3.7 连续梯度电泳
1.3.8 等电点聚焦电泳
1.3.9 双向电泳
1.3.10 琼脂糖凝胶电泳
1.3.11 毛细管电泳
1.4 生物大分子的制备技术
1.4.1 生物大分子制备的样品前处理
1.4.2 生物大分子的分离纯化
1.4.3 生物大分子的保存
第二部分 基础性实验
2.1 基础训练
2.1.1 生物化学实验要求
2.1.2 生物样品的采取、处理与保存
2.1.3 高等植物材料丙酮粉的制备
2.1.4 缓冲液的配制和氨基酸两性性质测定
2.2 蛋白质和氨基酸实验
2.2.1 蛋白质的两性性质及等电点的测定
2.2.2 氨基酸的薄层层析
2.2.3 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量
2.2.4 紫外吸收法测定蛋白质含量
2.2.5 双缩脲法测定蛋白质含量
2.2.6 Folin-酚法测定蛋白质含量
2.2.7 蛋白质的沉淀与变性反应
2.2.8 蛋白质脱盐（透析和凝胶过滤）
2.2.9 用DNS法鉴定蛋白质或多肽的N端氨基酸
2.2.10 等电点聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
2.3 酶学实验
2.3.1 酶的基本性质
2.3.2 过氧化氢酶活力的测定
2.3.3 脲酶km值简易测定法
2.3.4 淀粉酶活力测定
2.3.5 转氨酶活性鉴定（纸层析法）
2.3.6 植物苯丙氨酸解氨酶（PAL）的提取及活性测定
2.3.7 同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.4 分子生物学基础实验
2.4.1 质粒DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳检测
2.4.2 聚合酶链反应（PCR）技术体外扩增DNA
2.4.3 大肠杆菌感受态的制备和转化实验
2.4.4 PCR产物的T-A克隆及重组子的蓝白斑筛选
2.4.5 植物基因组DNA提取、酶切及电泳分析
2.5 糖类、脂质和维生素实验
2.5.1 葸酮比色法测定植物组织中总糖和可溶性糖的含量
2.5.2 还原糖含量测定——砷钼酸比色法
2.5.3 糖的薄层层析
2.5.4 维生素A含量测定
2.5.5 维生素C含量测定——2，6-二氯酚靛酚法
2.5.6 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法
第三部分 综合性实验
3.1 酵母蔗糖酶的提取及其性质的研究
3.1.1 蔗糖酶的提取与部分纯化
3.1.2 离子交换层析纯化蔗糖酶
3.1.3 蔗糖酶各级分活力及蛋白质含量的测定
3.1.4 分离产物的SDS-PAGE电泳检测
3.1.5 反应时间对产物浓度的影响
3.1.6 pH对蔗糖酶活力的影响
3.1.7 温度对蔗糖酶活力的影响和反应活化能的测定
3.1.8 底物浓度对催化反应速率的影响及米氏常数km和*大反应速率Vmax的测定
3.1.9 尿素（脲）抑制蔗糖酶的实验
3.2 溶菌酶的分离纯化与结晶
3.2.1 溶菌酶粗提液的制备
3.2.2 离子交换层析纯化溶菌酶
3.2.3 溶菌酶的透析与浓缩
3.2.4 凝胶过滤层析纯化溶菌酶
3.2.5 溶菌酶比活力测定
3.2.6 溶菌酶纯度的鉴定与结晶
3.3 猪血超氧化物歧化酶的分离纯化、活力测定及同工酶鉴定
3.3.1 猪血SOD的提取纯化
3.3.2 超氧化物歧化酶活力测定
3.3.3 SOD同工酶鉴定
3.4 种子蛋白质系统分析
3.4.1 种子蛋白质含量测定（凯氏定氮法）
3.4.2 种子蛋白质氨基酸组分分析（氨基酸自动分析仪法）
3.4.3 种子蛋白质组分分析（连续累进提取法）
3.4.4 种子蛋白质亚基分析（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）
3.5 绿色荧光蛋白的重组表达与纯化
附录
附录一 实验室安全及防护知识
附录二 常用缓冲溶液的配制方法
附录三 硫酸铵饱和度的常用表
附录四 相对离心力与离心机转速测算表
附录五 常用酸碱试剂浓度信息
附录六 透析袋的前处理
附录七 常用蛋白酶抑制剂
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