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生物科学

普通分子生物学

作者：王林嵩

出版社：科学出版社出版时间：2022-03-01

开本：其他页数： 280

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版权信息
内容简介
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节选

普通分子生物学版权信息

ISBN：9787030334978
条形码：9787030334978 ; 978-7-03-033497-8
装帧：一般胶版纸
册数：暂无
重量：暂无
所属分类：
自然科学
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生物科学

普通分子生物学内容简介

本书以中心法则为出发点，以核酸和蛋白质两类生物大分子为主线，从结构、功能、合成到调控，以调控为主。包含DNA结构和复制，RNA结构和转录，蛋白质的生物合成，基因表达的调控以及分子生物学的研究方法等普通分子生物学内容。简明、易教易学的同时具有前瞻性：并注重实践。参考文献分散在相应章节，便于随时查找。每章有小结和经典思考题。

普通分子生物学目录

目录
前言
第1章绪论 1
1.1分子生物学的概念 1
1.2分子生物学的研究内容 1
1.2.1 复制、转录、翻译和修复 2
1.2.2 基因表达调控 2
1.2.3 DNA重组技术 2
1.2.4 生物大分子的结构功能研究 3
1.2.5 基因组学、蛋白质组学及系统生物学研究 3
1.3分子生物学的发展历程 4
1.3.1 DNA及其结构的发现 5
1.3.2遗传密码的破译 7
1.3.3 信使RNA的发现 8
1.3.4 操纵子学说 8
1.3.5 中心法则的发展 9
1.3.6 DNA重组技术促进了分子生物学的发展 9
1.3.7 人类基因组计划的完成 10
1.3.8 蛋白质组学计划的提出 10
1.3.9 系统生物学的出现 10
1.4分子生物学的现状与展望 11
1.4.1 渗入生物科学与其他相关学科 11
1.4.2 在农业、医学等方面的应用 12
1.4.3 基因组学与蛋白质组学研究仍为分子生物学的重大课题 13
1.4.4 系统生物学将是21世纪生物学、农学和医学的核心驱动力 14
1.5分子生物学学习方法 14
本章小结 15
复习题 15
参考文献 16
第2章 DNA的结构和复制 17
2.1 DNA的结构 17
2.1.1 DNA的化学组成与结构 17
2.1.2 真核生物DNA的组织 27
2.1.3 基因组与基因组学 30
2.2 DNA的复制 31
2.2.1 DNA复制的化学基础 31
2.2.2 原核生物DNA的复制 33
2.2.3 真核生物DNA的复制 50
2.2.4 DNA复制的调控 57
2.3 DNA的损伤和修复 58
2.3.1 DNA的损伤类型 58
2.3.2 DNA损伤修复的机制 60
2.3.3 基因的突变 69
2.4 DNA的重组与转座 71
2.4.1 DNA的重组 71
2.4.2 DNA的转座 86
本章小结 89
复习题 91
参考文献 91
第3章 RNA的结构和转录 93
3.1 RNA的结构 93
3.1.1 RNA的化学组成与结构 93
3.1.2 RNA的功能和进化地位 95
3.2 RNA的转录 101
3.2.1 RNA聚合酶 101
3.2.2 原核生物的转录 105
3.2.3 真核生物的转录 112
3.3 RNA的转录后加工 118
3.3.1 rRNA的后加工 118
3.3.2 tRNA的后加工 122
3.3.3 mRNA的后加工 124
3.4 RNA组学 135
本章小结 137
复习题 139
参考文献 139
第4章蛋白质的生物合成 14l
4.1 中心法则和遗传信息流 141
4.1.1 中心法则 141
4.1.2 遗传密码的破解 142
4.1.3 密码子的组成规律 143
4.2多肽链合成的基本过程 145
4.2.1 翻译机制的构成 145
4.2.2 多肽链合成的起始 149
4.2.3 多肽链合成的延伸 152
4.2.4 多肽链合成的终止 154
4.2.5 多肽链正确合成机制 156
4.3多肽链合成后加工 159
4.3.1 多肽链合成后的加工修饰 159
4.3.2 蛋白质的定向运输 16l
4.3.3 蛋白质的折叠 168
4.3.4 蛋白质组学 170
本章小结 172
复习题 173
参考文献 174
第5章基因表达的调控 175
5.1原核生物基因表达调控 175
5.1.1 概述 175
5.1.2 乳糖操纵子 178
5.1.3 色氨酸操纵子 184
5.1.4 其他操纵子 187
5.1.5 转录后调控 190
5.2真核生物基因表达调控 192
5.2.1 转录前调控 193
5.2.2 转录调控 198
5.2.3 转录后调控 202
5.2.4 翻译水平的调控 204
5.2.5 翻译后加工 207
5.2.6 真核生物基因的表达调控举例——热休克蛋白 208
本章小结 210
复习题 210
参考文献 210
第6章分子生物学的研究方法 212
6.1核酸操作基础技术 212
6.1.1 核酸电泳 212
6.1.2 限制性酶切和DNA分子的连接 213
6.1.3 核酸分子杂交 214
6.1.4 PCR技术 219
6.2蛋白质操作基础技术 220
6.2.1 蛋白质的分离纯化 220
6.2.2 蛋白质的鉴定技术 223
6.2.3 蛋白质高级结构的分析 227
6.2.4蛋白质组学相关技术 229
6.3 DNA克隆 233
6.3.1 目的基因的获得 233
6.3.2 重组DNA分子的构建 235
6.3.3 载体和目的基因的连接 237
6.3.4 重组DNA分子导入受体细胞 237
6.3.5 含有重组DNA分子的受体细胞的筛选和鉴定 240
6.4基因功能鉴定技术 242
6.4.1 基因功能鉴定的策略 242
6.4.2 转基因技术 242
6.4.3基因敲除技术 246
6.4.4基因沉默技术 249
6.4.5 外源基因表达的鉴定和分析 252
6.5大分子相互作用的研究技术 253
6.5.1 DNA-蛋白质相互作用分析 253
6.5.2 蛋白质-蛋白质相互作用分析 259
本章小结 265
复习题 265
参考文献 266
分子生物学大事年表和诺贝尔奖 268

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普通分子生物学节选

第1章绪论分子生物学(molecular biology)是由生物化学、微生物学、遗传学、生物物理学、细胞生物学、免疫学等学科发展起来的一门研究和阐述生物大分子结构与功能的学科，也是当前生命科学中发展*快的一门学科。广泛应用于生物、医药学、农业等各个方面，已成为解决生命科学难题的领头学科。近年来，基因组学、蛋白质组学及生物信息学的兴起，使得分子生物学当之无愧地成为当今生命科学的热点和前沿。 1.1 分子生物学的概念 20世纪中期以来，随着DNA双螺旋结构的提出和蛋白质空间结构的解析，生命科学研究进入了分子生物学时代。对遗传信息载体DNA和生命功能的主要体现者蛋白质的研究，成为生命科学的主要内容。分子生物学是以核酸、蛋白质等生物大分子的形态、结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的重要性、规律性和相互关系为主要研究内容，由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞生物学和免疫学等多种学科经过相互交叉、相互渗透而发展起来的，从分子水平研究生命本质的一门新兴学科。广义上讲的分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征、功能及其重要性、规律性和相互关系的科学，是人类从分子水平上真正揭示坐物世界的奥秘，由被动地适应自然转向主动地改造和重组自然的基础学科。从这个角度来看，分子生物学几乎包括了生物学领域的所有方面。但一些内容，如蛋白质的结构、运动和功能及酶的作用机理和动力学等，随着其研究的深入已逐步发展成了各自独立的学科。因此，目前人们通常采用狭义的概念。狭义的分子生物学的研究范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究DNA的结构、功能、复制、转录和表达调控等过程，其中也涉及与这些过程相关的蛋白质（包括酶）的结构、功能。 1.2 分子生物学的研究内容现代生物学研究发现，一切生物体中的各类有机大分子都是由完全相同的单体（如蛋白质分子中的20多种氨基酸及DNA和RNA中的8种核苷酸）所组成，由此产生了分子生物学的3条基本原理。 (1)构成生物大分子的单体在不同生物中都是相同的； (2)生物体内遗传信息的表达遵循共同的规则——中心法则； (3)某一特定生物体所拥有的生物大分子单体的排列决定了它的属性。分子生物学产生的初始，有两个主要研究方向：一个方向是以化学或物理学手段为主，着重研究生物大分子的结构，特别是蛋白质的三维结构或构象；另一个方向是以生物学技术为主，研究生物信息的传递和复制。盾来，在20世纪50年代初期，两者汇合并与其他学科领域融合，形成了现代分子生物学。从严格意义上讲，分子生物学研究的内容难以明确界定。因为分子生物学研究的对象是生物大分子，所以诸如遗传信息的传递，基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能，以及细胞信号的转导等与生物大分子相关的事件都属于分子生物学研究的内容。故依据当今世界生物发展的潮流和研究方向，借鉴前人的分类方法，我们将分子生物学的研究内容主要限定在下述5个方面。 1.2.1 复制、转录、翻译和修复 DNA是携带遗传信息的化学实体，是遗传信息的贮存者。DNA如何在多种酶以及其他相关协助分子的参与下，进行复制、转录、翻译、突变及修复等是该部分的研究重点。 DNA的复制：生物性状的遗传是通过DNA自我复制来实现的，而复制方式是半保留复制。因此，DNA的半保留复制机理、复制过程中各种因子的相互作用以及这些作用对复制的影响、复制的方式及特点等是其主要的研究内容。 DNA的转录与翻译：DNA作为能够自我复制、稳定存在的单位，其生物功能多数是以蛋白质的形式表达出来的，即贮藏在DNA中的生物信息都必须首先被转录生成RNA，才能得到表达。而且，它们从非活化的转录状态转变到可以进衍转录的活性状态要经过一系列的活化过程。那么，生物信息是如何传递的？DNA如何转录为RNA，RNA与蛋白质又是如何对应的？因此，本部分主要研究转录、反转录的基本过程及机制，转座的分子机制，翻译前的mRNA分子的剪接、加工、编辑和翻译过程中大分子的相互作用以及翻译后多肽链的修饰与折叠、功能形成，密码子的破译及其性质，蛋白质合成的机制等。 DNA的突变与损伤修复：由于DNA在生命过程中有至高无上的地位，DNA复制的准确性及DNA损伤的修复具有特别重要的意义。DNA复制具有高度的忠实性，保证了生物遗传的稳定性。但DNA复制过程错综复杂，正常的细胞活动、细胞与环境的相互作用或特定的化学、物理因素都会引起DNA序列的改变——突变。那么突变发生时，细胞如何及时纠正这些错误？生物体靠什么来保证DNA复制的高度忠实性？这些问题都是本部分的研究重点。 1.2.2 基因表达调控在个体生长发育过程中，生物遗传信息的表达按一定的时序发生变化，并随着环境的变化而不断修正。基因表达可在多层次，如DNA水平、转录、转录后加工、翻译和翻译后加工等水平上进行调节，但*主要的是转录水平的调节。原核生物的基因组和染色体结构较为简荜，转录和翻译在同一时间和空间内发生，基因表达调控主要发生在转录水平。真核生物有细胞核结构，转录和翻译过程在时间和空间上都被分隔开，且在转录和翻译后又有复杂的加工修饰过程，因此基因表达调控可以发生在多种水平上。目前，基因表达调控研究主要表现在信号转导研究、转录因子研究、RNA剪接、非编码RNA研究等方面。 1.2.3 DNA重组技术 DNA重组技术是20世纪70年代随着分子生物学的兴起而发展起来的一门技术，其目的是将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状或获得目的蛋白。DNA重组技术是核酸化学、蛋白质化学、酶工程、微生物学、遗传学、细胞学长期深入发展的结晶，而限制性内切核酸酶、DNA连接酶及其他工具酶的发现和应用则是这一技术得以建立的关键。DNA重组技术有着广阔的应用前景：**，用于发酵工业，大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽，如激素、抗生素、酶类及抗体等。例如，在9L细菌培养液中，用大肠杆菌生产人的生长激素释放抑制因子的产量等于从大约50万头羊的脑中提取得到的量。现在人的胰岛素、人的生长激素、人的胸腺激素a-l、人的干扰素、牛的生长激素、乙型肝炎病毒抗原和口蹄疫病毒抗原等都可用大肠杆菌发酵生产，其中有的还可在酵母或枯草杆菌中表达，这就为大规模的工业发酵开辟了新的途径。第二，用于定向改造某些生物的基因组结构，使它们所具备的特殊经济价值或功能得以成百上千倍的提高。例如，一种含有分解各种石油成分的重组DNA的超级细菌，能够快速分解石油，从而恢复被石油污染的海域或土壤。美国陆军研究发展和工程中心利用重组DNA技术，通过细菌获得一种强度超过钢的特殊纤维，以此用于生产防弹背心、帽子、降落伞绳索和其他高强度的轻型装备。第三，用于基础研究。分子生物学研究的核心是遗傣信息的结构、传递和控制。那么根据中心法则，我们要研究的就是从DNA到RNA，再到蛋白质的全过程。因此，无论是对启动子的研究，还是对转录因子、功能基因的克隆与分析都离不开重组DNA技术。重组DNA技术的成就和提出的问题促进了遗传学、生物化学、微生物学、生物物理学和细胞学等学科的发展，并且有助于这些不同学科的结合。目前生物工艺学或生物工程学这一新兴学科的产生，就是这种趋势的反映。 1.2.4 生物大分子的结构功能研究生物大分子要发挥功能，必须满足两个条件：**，具有特定的空间结构（三维结构）；第二，在它发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。没有稳定的三级结构和结构运动，生物大分子很难发挥其生物功能。结构分子生物学就是以生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能的关系为基础，进一步阐明生命现象的学科。主要利用物理学理论和实验，阐明与生物大分子发挥生物功能时的结构变化及其与其他分子相互作用的过程。它包括结构的测定、结构运动变化规律的探索和结构与功能相互关系3个方向的研究，如膜蛋白的拓扑学、蛋白质的二级结构中残基的接近和移动以及蛋白质的三级折叠等。它是分子生物学的重要组成部务。 1.2.5 基因组学、蛋白质组学及系统生物学研究 20世纪90年代初期，美国生物学家提出并实施了人类基因组计划、经过各国科学家多年的努力，人类基因组计划取得了巨大成绩，已经完成了人类DNA序列的框架图，迄今已测定的表达序列标签几乎覆盖了人类所有基因。同时在利用基因表达连续分析和DNA芯片等技术研究mRNA水平上的基因活动规律取得了较大进展。但是，mRNA水平的基因表达状况并不能完全代表蛋白质水平的状况，mRNA与蛋白质间的相关系数仅为0.4～0.5，蛋白质才是生命功能的主要执行者，这促使人们从组织或细胞内整体蛋白质的组成、表达和功能模式去研究生命活动的基本规律。在这样的形势下，生命科学已进入后基因组时代。在后基因组时代，生物学研究的重点已从揭示生命所有遗传信息转移到在整体水平上对生物功能的研究。目前已有多种生物，如大肠杆菌、酵母、线虫、果蝇、大鼠、小鼠、拟南芥、水稻、杨树等的基因组序列测序完毕。这极大地丰富了人类的知识宝库，加快了人类认识自然和改造自然的步伐。但是测定基因组序列仅仅是了解基因的**步，随着基因组测序工作的初步完成，基因组学( genomics)的研究由结构基因组学向功能基因组学(functional genomics)转移，功能基因组学也往往被称为后基因组学( post-genomics)，其研究内容包括基因功能研究、基因表达分析及突变检测等。它利用结构基因组学所提供的序列信息和产物，发展和应用新的实验手段，通过在基因组或系统水平上全面分析影响整个生命过程的特定序列表达谱及功能，使得生物学研究从对单一基因或蛋白质的研究转向多个基因或蛋白质同时进行系统的研究。蛋白质组( proteome)指的是一个基因组所表达的全部蛋白质。蛋白质组学(pro-teomics)的研究主要有两方面：一是结构蛋白质组学；二是功能蛋白质组学。其研究前沿大致分为3个方面：①针对有关基因组或转录组数据库的生物体或组织细胞，建立其蛋白质组或亚蛋白质组及其蛋白质组连锁群，即组成性蛋白质组学。②以重要生命过程或人类重大疾病为对象，进行重要生理病理体系或过程的局部蛋白质组或比较蛋白质组学研究。③通过多种先进技术研究蛋白质之间的相互作用，绘制某个体系的蛋白质，即相互作用蛋白质组学，又称为“细胞图谱”蛋白质组学。此外，随着蛋白质组学研究的深入，又出现了一些新的研究方向，如亚细胞蛋白质组学、定量蛋白质组学等。系统生物学(svstems biology)是生命科学研究领域的一门新兴学科，是研究一个生物系统中所有组成成分（基因、mRNA、蛋白质等）的构成，以及在特定条件下这些组分间相互关系的学科。系统生物学是一种整合型学科，对多细胞生物而言，要实现从基因到细胞、组织和个体各层次的整合，由生物体内各种分子的鉴别及其相互作用的研究到途径、网络、模块，*终完成整个生命活动的路线图。经典的分子生物学采用多种手段研究个别的基因和蛋白质，是一种垂直型的研究。基因组学、蛋白质组学和其他各种“组学”则往往以单一的手段同时研究成千上万个基因或蛋白质，是水平型研究。作为后基因组时代的新秀，系统生物学与基因组学、蛋白质组学等各种“组学”的不同之处在于，它是一种以整体性研究为特征的大科学，把水平型研究和垂亩型研究整合起来，成为一种“三维”研究。因此，系统生物学是典型的多学科交叉研究，它需要生命科学、信息科学、数学、计算机科学等各种学科的共同参与。它要研究所有的基因、所有的蛋白质、所有组分间的相互关系。 1.3 分子生物学的发展历程科学领域中任何一门学科的形成和发展，一般很难准确地说明它是何时、何人创始的。经历了漫长而艰辛的过程，逐步走向

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