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医学遗传学实验
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医学遗传学实验

作者：彭翠英，刘俊
出版社：科学出版社出版时间：2022-01-01
开本： 其他 页数： 120
本类榜单：医学销量榜
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医学遗传学实验 版权信息

医学遗传学实验 内容简介

本书分三部分：**篇常用仪器及基本实验方法：1.显微镜的结构和使用2.荧光显微镜的结构与使用3.人类基因组DNA的提取与鉴定4.PCR技术5.DNA的性内切酶酶解技术6.核酸的凝胶电泳技术7.聚丙烯酰胺凝胶电泳技术8.琼脂糖凝胶电泳技术9.DNA分子杂交技术。第二篇验证性实验1.人类外周血淋巴细胞的培养及染色体标本制备技术2.正常人类非显带染色体的核型分析第三篇综合创新性实验1.比较基因组杂交检测流产胚胎2.MPLA技术检测基因突变

医学遗传学实验 目录

目录
**篇常用仪器及基本技术方法
实验一普通光学显微镜的结构与使用3
实验二荧光显微镜的结构与使用9
实验三人类基因组DNA的提取与鉴定技术13
实验四琼脂糖凝胶电泳技术16
实验五聚合酶链反应（PCR）技术18
实验六DNA限制性内切酶酶切技术21
实验七DNA分子杂交技术23
实验八聚丙烯酰胺凝胶电泳技术27
第二篇验证性实验
实验九人类外周血淋巴细胞的培养及染色体标本制备30
实验十人类非显带染色体的核型分析33
实验十一人类G显带染色体标本的制备与观察36
实验十二人类G显带染色体核型分析38
实验十三人类高分辨显带染色体（HRB）标本的制备与观察43
实验十四人类染色体Q显带技术48
实验十五人类外周血淋巴细胞姐妹染色单体互换（SCE）技术50
实验十六人类性染色质标本的制作与观察52
实验十七减数分裂标本的制备与观察55
实验十八微核的制作与观察57
实验十九性别的基因诊断59
实验二十细菌抑制筛选试验63
实验二十一血清肌酸激酶活性的测定66
实验二十二肝豆状核变性病的筛查69
实验二十三ABO血型与PTC尝味试验71
实验二十四遗传病系谱分析73
实验二十五Bayes法在遗传咨询中的应用76
第三篇综合创新性实验
实验二十六肥胖的判断标准与等级评定81
实验二十七人类肠道微生物基因组DNA的提取86
实验二十八人类肠道微生物多样性分析88
实验二十九比较基因组杂交实验91
实验三十多重连接依赖的探针扩增检测亚端粒区拷贝数变化96
实验三十一单核苷酸多态性分析99
实验三十二遗传咨询101
参考文献104
附录106
附录一生物绘图106
附录二实验常用试剂及配制方法107
展开全部

医学遗传学实验 节选

绪论 一、医学遗传学实验目的和要求 《医学遗传学》是遗传学与医学相结合的一门前沿学科，研究遗传病发生机制、传递方式、诊断、治疗、预后、再发风险和预防方法，从而控制遗传病在一个家庭中的再发，降低它在人群中的危害。 医学遗传学实验课是医学遗传学课程的重要内容。通过实验，有助于加强和巩固理论基础知识，并了解和掌握本学科的基本实验内容和操作技能。通过实验操作，可以锻炼学生的动手能力；通过实验操作，可以使学生掌握绘图、书写实验记录和实验报告的基本方法与技巧；通过实验操作，也可以培养学生分析问题、综合问题和解决问题等方面的能力。 为此，要求学生做到以下几点：实验课前做好预习，明确实验目的、实验原理；复习有关理论内容；熟悉实验的主要步骤；初步估计和判定实验的可能结果。 二、实验操作前的注意事项 1.准备好教材、实验指导、实验报告本、文具等个人**工具。 2.穿好白大褂，按规定座位就座。 3.保持安静，认真听讲，并仔细观察带教老师的示范操作。 三、实验操作过程中的注意事项 1.认真、规范操作，仔细观察和综合分析实验所出现的现象与结果并及时记录。 2.如果实验结果与理论结果不一致，须及时进行科学分析，判断结果的可靠性，探求出现误差的原因。 3.各种实验试剂应轻拿轻放，用后放回原处，瓶盖封严。 4.使用微量加样器时，一定调整好取用量，按使用要求操作。 5.实验室应保持肃静，注意清洁卫生，实验中用过的废弃物品要及时清理、收集到垃圾桶，避免堵塞下水管道。 四、实验后的注意事项 1.实验后，整理清洁所用仪器、设备，注意放回原位，以备下次使用。 2.如有仪器损坏，要及时填写破损报告，并报告老师。 3.值日生要打扫、清洁实验室。 4.按要求做好实验记录，并提交实验报告。 5.离开实验室前，检查并关闭门、窗、水、电。 五、实验室的意外处理 实验室如遇着火、烫伤等意外事件发生，必须镇静做紧急处理，并立即报告老师。 1.着火：如遇酒精灯推倒或其他原因着火，首先将一切易燃品移至远处，然后用CO2灭火器灭火或者切断电源。 2.灼伤或烫伤：皮肤被火灼伤或烫伤，用烫伤软膏涂抹，如伤势较重，立即送医院治疗。 3.有毒有害药品：如有毒药品泼溅到皮肤上，如EB、同位素等，应用大量清水进行清洗，必要时，去医院处理。 4.割伤出血：遇玻璃割伤出血，可用碘酒或红药水消毒后，用纱布包扎。如有玻璃留在伤口，处理前应先取出。 5.被实验动物咬伤：立即去医务室消毒、包扎伤口，并注射疫苗，以防感染。 **篇常用仪器及基本技术方法 实验一普通光学显微镜的结构与使用 一、实验目的 1.熟悉普通光学显微镜的主要构造及其性能。 2.掌握低倍镜及高倍镜的使用方法。 3.初步掌握油镜的使用方法。 4.了解光学显微镜的维护方法。 二、实验原理 光学显微镜（lightmicroscope）是生物科学和医学研究领域常用的仪器，是研究人体及其他生物机体组织和细胞结构强有力的工具。光学显微镜简称光镜，是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器。一台普通光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成，而光学系统则主要包括光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件。物镜和目镜的结构虽然比较复杂，但它们的作用都是相当于一个凸透镜，目镜将标本放大成一个虚像，通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处，在视网膜上形成一个直立的实像。分辨力（resolvingpower）也称为分辨率，是指人眼通过显微镜分辨出标本上相互接近的两点间的*小距离的能力。是光镜的主要性能指示。显微镜的分辨力由物镜的分辨力所决定与目镜分辨力无关。光镜的分辨力（R）（R值越小，分辨力越高）可以下式计算： 这里n为聚光镜与物镜之间介质的折射率（空气为1，油为1.5）；θ为标本对物镜镜口张角的半角，sin的*大值为1；λ为照明光源的波长（白光约为500nm）。放大率或放大倍数是光镜性能的另一重要参数，显微镜的放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 三、实验用品和材料 1.器材普通光学显微镜、擦镜纸、香柏油或液体石蜡（石蜡油）、羊毛交叉装片、英文字母或数字的装片。 2.清洁剂（乙醚7份+无水乙醇3份）、二甲苯。 四、实验方法和步骤 （一）光学显微镜的基本构造及功能 1.机械部分 （1）镜筒：为光镜*上方或镜臂前方的圆筒状结构，其上端装有目镜，下端与物镜转换器相连。光镜可分为单筒式或双筒式两类。单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种。而双筒式光镜的镜筒均为倾斜的。 （2）物镜转换器：又称物镜转换盘，是安装在镜筒下方的一圆盘状构造，可顺时针或反时针方向自由旋转。其上均匀分布有3～4个圆孔，用以装载不同放大倍数的物镜。使用时注意凭手感使所需物镜准确到位。 （3）镜臂：为支持镜筒和镜台的弯曲状构造，是取用显微镜时握拿的部位。镜筒直立式光镜在镜臂与其下方的镜柱之间有一倾斜关节，可使镜筒向后倾斜一定角度以方便观察，但使用时倾斜角度不应超过45°，否则显微镜则由于重心偏移容易翻倒。在使用临时装片时，千万不要倾斜镜臂，以免液体或染液流出，污染显微镜（图1-1-1，图1-1-2）。 图1-1-1Olympus显微镜（BHS型） 图1-1-2光学显微镜的构造 （4）调节器：也称调焦螺旋，为调节焦距的装置，位于镜臂的上端（镜筒直立式光镜）或下端（镜筒倾斜式光镜），分粗调螺旋和细调螺旋两种。粗调螺旋使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度的升降，能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中，适于低倍镜观察时的调焦。而细调螺旋只能使镜筒或载物台缓慢或较小幅度的升降，适用于高倍镜和油镜的聚焦或观察标本的不同层次，一般在粗调螺旋调焦的基础上再使用细调螺旋，精细调节焦距。 （5）载物台：也称镜台，是位于物镜转换器下方的方形平台，是放置被观察的玻片标本的地方。平台的中央有一圆孔，称为通光孔，下方光线经此孔照射到标本上。 在载物台上装有标本移动器（也称标本推进器），移动器上安装的弹簧夹用于固定玻片标本，另外，转动与移动器相连的两个螺旋可使玻片标本前后左右地移动，这样寻找物像时较为方便。 在标本移动器上附有纵横游标尺，可以计算标本移动的距离和确定标本的位置。游标尺一般由主标尺（A）和副标尺（B）组成。副标尺的分度为主标尺的9/10。使用时先看到标尺的0点位置，再看主副标尺刻度线的重合点即可读出准确的数值。 （6）镜柱：为镜臂与镜座相连的短柱。 （7）镜座：位于显微镜*底部的构造，为整个显微镜的基座，用于支持和稳定镜体。有的显微镜在镜座内装有照明光源等构造。 2.光学系统部分光镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置（反光镜、聚光器和光圈等）。 （1）目镜：又称接目镜，安装在镜筒的上端，将物镜所放大的物像进一步放大的作用。每个目镜一般由两个透镜组成，在上下两透镜之间安装有能决定视野大小的金属光阑——视场光阑，此光阑的位置即是物镜所放大实像的位置，故可将一小段头发黏附在光阑上作为指针，用以指示视野中的某一部分供他人观察。每台显微镜通常配置2～3个不同放大倍率的目镜，常见的有5×、10×和15×（×表示放大倍数）的目镜，可根据不同的需要选择使用，*常使用的是10×目镜。 （2）物镜：也称接物镜，安装在物镜转换器上。每台光镜一般有3～4个不同放大倍率的物镜，是显微镜*主要的光学部件，决定着光镜分辨力的高低。常用物镜的放大倍数有10×、40×和100×等几种。一般将8×或10×的物镜称为低倍镜；将40×或45×的称为高倍镜；将90×或100×的称为油镜（这种镜头在使用时需浸在油中）。 在每个物镜上通常都刻有能反映其主要性能的参数，主要有放大倍数和数值孔径（如10/0.25、40/0.65和100/1.25），该物镜所要求的镜筒长度和标本上的盖玻片厚度（160/0.17，单位：mm）等，另外，油镜上还常标有“油”或“Oil”的字样。 油镜使用时需要用香柏油或石蜡油作为介质，这是因为香柏油或石蜡油折射率与玻璃近似的时（玻璃、香柏油和石蜡油的折射率分别为1.52、1.51、1.46，空气为1），可减少光线的折射，增加视野亮度，提高分辨力。物镜分辨力的大小取决于物镜的数值孔径（numericalaperture，NA），又称为镜口力，其数值越大，则表示分辨力越高。 图1-1-4物镜的性能参数及工作距离 C线为盖玻片的上表面，10×物镜的工作距离为7.63mm；40×物镜的工作距离为0.198mm；10/0.25、40/0.65、100/1.25表示镜头的放大倍数和数字孔径。160/0.17表示显微镜的机械镜筒长度（标本至目镜的距离）和盖玻片的厚度。即镜筒长度为160mm，盖玻片厚度为0.17mm 不同的物镜有不同的工作距离。所谓工作距离是指显微镜处于工作状态（焦距调好、物像清晰）时，物镜*下端与盖玻片上表面之间的距离。物镜的放大倍数与其工作距离成反比。当低倍镜调节到工作距离后，可直接转换高倍镜或油镜，细调螺旋稍加调节焦距便可见到清晰的物像，这种情况称为同高调焦。 不同放大倍数的物镜也可从外形上加以区别，一般来说，物镜的长度与放大倍数成正比，低倍镜*短，油镜*长，而高倍镜的长度介于两者之间（表1-1-1）。 表1-1-1标准物镜的性质 （3）聚光器：位于载物台的通光孔的下方，由聚光镜和光圈构成，其主要功能是光线集中到所要观察的标本上。聚光镜由2～3个透镜组合而成，可将光线汇集成束。在聚光器的左下方有一调节螺旋可使其上升或下降调节光线的强弱，升高聚光器可使光线增强，反之则光线变弱。 光圈也称为彩虹阑或孔径光阑，位于聚光器的下端，是一种能控制进入聚光器的光束大小的可变光阑。它由十几张金属薄片组合排列而成，其外侧有一小柄，可使光圈的孔径开大或缩小，以调节光线的强弱。在光圈的下方常装有滤光片框，可放置不同颜色的滤光片。 （4）反光镜：位于聚光镜的下方，可向各方向转动，能将来自不同方向的光线反射到聚光器中。反光镜有两个面，一面为平面镜，另一面为凹面镜，凹面镜有聚光作用，适于较弱光和散射光下使用，光线较强时则选用平面镜（现在有些新型的光学显微镜都有自带光源，而没有反光镜；有的二者都配置）。 （二）光学显微镜的使用方法 1.准备右手握住镜臂，左手托住镜座将显微镜小心从镜箱中取出，放置在实验台的偏左侧，以镜座的后端离实验台边缘6～10cm为宜。检查显微镜的各个部件是否完整和正常。 2.低倍镜的使用方法 （1）对光：打开显微镜上的电源开关，转动粗调螺旋，使镜筒略升高（或使载物台下降），调节物镜转换器，使低倍镜转到工作状态（即对准通光孔），当镜头完全到位时，可听到轻微的扣碰声。打开光圈使聚光器上升到适当位置（以聚光镜上端透镜平面稍低于载物台平面的高度为宜）。然后用左眼向着目镜内观察（注意两眼应同时睁开），同时调节亮度旋钮，使视野内的光线均匀、亮度适中。 （2）放置玻片标本：将玻片标本放置到载物台上弹簧夹固定好（注意：使有盖玻片或有标本的一面朝上），然后转动标本移动器的螺旋，使观察的标本部位对准通光孔的中央。 （3）调节焦距：用眼睛从侧面注视低倍镜，同时用粗调螺旋使载物台上升，直至低倍镜头距玻片标本的距离小于0.6cm，注意操作时必须从侧面注视镜头与玻片的距离，以避免镜头碰破玻片。然后用左眼在目镜上观察，同时用左手慢慢转动粗调螺旋使使载物台下降直至视野中出现物像为

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